3D生物打印無支架神經(jīng)結(jié)構(gòu)促進大鼠面神經(jīng)再生

作者：潘兵磊 王玲

外周面神經(jīng)損傷通常是由外傷、手術(shù)切除良性或惡性頭部或頸部腫瘤等引起的,。常采用自體神經(jīng)移植的方式來進行面部神經(jīng)節(jié)段性缺損的重建,，然而，永久性供區(qū)發(fā)病率,、犧牲供神經(jīng)的可用性,、額外手術(shù)或手術(shù)時間延長，明顯限制了該方法的臨床應(yīng)用,。為了彌補自體神經(jīng)移植的缺陷,，結(jié)合最先進的3D生物制造技術(shù)、采用容易獲得的干細胞和各種類型的生物材料/支架來制造組織工程神經(jīng)結(jié)構(gòu),，正成為一種促進周圍神經(jīng)再生的新方法,。

美國賓夕法尼亞大學的Qunzhou Zhang團隊探討了人牙齦源性間充質(zhì)干細胞(GMSCs)作為3D生物打印無支架神經(jīng)結(jié)構(gòu)中唯一的細胞成分的潛在用途，驗證該細胞可移植到大鼠面部神經(jīng)缺損的可行性,。

圖1. 三維GMSCs細胞球體的生成

該團隊從人類牙齦組織(GMSCs)中分離出一種獨特的源于神經(jīng)嵴的MSC亞群,。將GMSCs細胞進行培養(yǎng)，進行免疫細胞化學研究。采用流式細胞術(shù)檢測GMSC細胞球的凋亡和壞死,。在二維和三維膠原支架上分別研究GMSCs細胞和GMSCs細胞球向神經(jīng)細胞的分化趨勢,。采用3D生物打印方式制造含GMSCs細胞的無支架神經(jīng)組織，培養(yǎng)一段時間后將其植入成年大鼠面部,，運用面癱評分進行面部功能分析,，記錄肌肉動作電位，最后進行組織學和免疫組化研究,。

圖2.將GMSC球體3D生物打印無支架神經(jīng)結(jié)構(gòu)

該研究證明了GMSCs傾向于形成致密的三維球體,，其直徑在400~500 um之間，也可以產(chǎn)生自己的細胞外基質(zhì),，因此適用于3D生物打�,。▓D1）。當在2D或3D膠原支架條件下培養(yǎng)時,，GMSC球蛋白比其粘附物更容易分化為神經(jīng)元細胞和神經(jīng)鞘樣細胞,。3D生物打印神經(jīng)移植物縱、橫切片的組織學分析顯示其具有排列整齊的神經(jīng)樣結(jié)構(gòu)（圖2）,，證明了3D生物打印無支架神經(jīng)組織的可行性,。將3D生物打印神經(jīng)移植到大鼠面神經(jīng)頰后，7周的面癱評分高于硅膠管對照組（圖3）,。

圖3. 3D生物打印無支架神經(jīng)組織移植可促進大鼠面神經(jīng)缺損的再生

最近的研究表明,，人類GMSC具有誘導成神經(jīng)祖細胞樣細胞(NPCs)的傾向，其對周圍神經(jīng)再生的治療效果優(yōu)于親代GMSC,。同時,，該團隊的研究展示了利用可植入的GMSC球面體構(gòu)建三維生物打印無支架神經(jīng)的可行性，促進了大鼠面神經(jīng)缺損的修復和再生,。因此,，目前的研究提供了大量證據(jù)表明，GMSCs是一種易于獲得的干細胞來源,，可作為細胞成分用于3D生物打印無支架神經(jīng)構(gòu)建,，以滿足臨床對周圍神經(jīng)修復和再生的日益增長的需求。

供稿人：潘兵磊 王玲
供稿單位：機械制造系統(tǒng)工程國家重點實驗室